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目的:去阻遏持续高产AmpC酶,或产生超广谱b-内酰胺酶(ESBLs),或同时高表达这两类酶,是阴沟肠杆菌对多种b-内酰胺类抗生素耐药的主要机制。方法:建立了一种改良的酶提取物三维试验法,在常规NCCLS纸片扩散法基础上接种大肠杆菌ATCC 25922,在头孢西叮药敏纸片周围放射性切出琼脂小槽,待测菌的粗酶提取物在槽内扩散,与头孢西叮纸片扩散相交。结果:由于AmpC酶水解头孢西叮,出现抑菌圈内生长细菌,这一现象能被加入槽内的邻氯西林抑制,而ESBLs不能水解头孢西叮,无此现象。因邻氯西林不能抑制ESBLs活性,同样用头孢曲松取代头孢西叮纸片,用邻氯西林抑制槽内AmpC酶,可测出ESBLs。使用该法检测分别产AmpC 酶、ESBLs的标准株和24株临床分离多重耐药的阴沟肠杆菌。结果各种标准株检测无误,24株阴沟肠杆菌中,14株去阻遏持续高产AmpC酶试验阳性,4株产ESBLs试验阳性,5株此两类酶检测均阳性,1株此两类酶检测均阴性,原因待分析。结论:对于阴沟肠杆菌,这种改良的酶提取物三维试验法能较好地鉴别持续高产AmpC酶和ESBL的阴沟肠杆菌,并适用于临床常规检验。