整合素连接激酶在胃癌细胞中的表达及其抑制剂对胃癌细胞生长的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangjian_heu
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目的

观察整合素连接激酶(ILK)在胃癌细胞中的表达以及使用ILK小分子抑制剂对胃癌细胞增殖侵袭和下游信号通路产生的影响。

方法

蛋白质印迹法(Western blot)检测6株胃癌细胞和正常胃黏膜上皮细胞中ILK蛋白表达;噻唑蓝(MTT)实验和平板克隆形成实验检测ILK小分子抑制剂Cpd22对AGS和MKN1细胞株的增殖影响;Transwell实验检测ILK抑制剂对这两株胃癌细胞侵袭的影响;Western blot检测ILK受到抑制后胃癌细胞中磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)以及磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)蛋白水平的改变。应用GraphPad Prism 7统计分析作图,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用Student’s t检验分析。

结果

ILK抑制剂作用于胃癌细胞后增殖明显受到抑制[MTT:AGS实验组(0.741±0.005)比对照组(1.000±0.028),t=8.967,P<0.05;MKN1实验组(0.726±0.024)比对照组(1.000±0.020),t=8.745,P<0.05。平板克隆:AGS实验组(311.000±18.560)个,对照组(804.000±15.39)个,t=20.450,P<0.05;MKN1实验组(220.700±4.807)个,对照组(536.600±20.950)个,t=14.680,P<0.05]。ILK抑制剂可以抑制胃癌细胞侵袭能力[AGS:实验组(17.500±0.957)个,对照组(59.500±1.555),t=23.000,P<0.05;MKN1:实验组(29.500±1.708)个,对照组(78.000±3.559)个,t=12.290,P<0.05]。ILK抑制剂降低胃癌细胞p-Akt和p-GSK3β表达,结果差异有统计学意义(p-Akt:AGS 0 h为0.780±0.039,48 h为0.484±0.003,t=8.058,P<0.05;MKN1 0 h为0.670±0.007,48 h为0.301±0.004,t=46.530,P<0.05;p-GSK3β:AGS 0 h为0.847±0.040,48 h为0.199±0.011,t=15.710,P<0.05; MKN1 0 h为0.828±0.039,48 h为0.315±0.015,t=12.830,P<0.05)。

结论

ILK在胃黏膜上皮细胞及胃癌细胞中都有表达,ILK小分子抑制剂可以抑制ILK的功能,影响胃癌细胞的增殖和侵袭能力,并且这些变化与PI3K/Akt通路及p-GSK3β的表达明显相关。

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