论文部分内容阅读
目的
介绍牙本质在不完全脱矿下免疫荧光双标染色方法，研究Ⅰ型胶原和硫酸软骨素在人牙本质中的分布情况，以期进一步理解牙本质湿粘接的机制。
方法选取新鲜拔除的无龋第三磨牙8颗，制备30 µm厚的牙本质切片40张，用37％磷酸凝胶酸蚀15 s，应用免疫荧光双重标记方法和激光共聚焦扫描显微镜，观察硫酸软骨素经甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮（tosyl- phenylalanyl chloromethyl ketone，TPCK）处理的胰蛋白酶消化去除前后相对胶原纤维的分布位置。
结果硫酸软骨素分布于牙本质小管管腔以及管周牙本质，Ⅰ型胶原纤维在管间牙本质和管周牙本质均存在；经特异性酶处理去除硫酸软骨素后，荧光强度明显减弱甚至消失。
结论免疫荧光双重标记结合激光共聚焦扫描显微镜可以在牙本质不完全脱矿的情况下研究其内部有机成分的分布；硫酸软骨素分布于牙本质小管管腔及管周牙本质，Ⅰ型胶原纤维分布于管间牙本质和管周牙本质。