萝卜抽薹性研究的AFLP体系建立与优化

来源 :中国农学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ReganCai
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为探讨萝卜抽薹紧密连锁基因,通过寻找萝卜AFLP体系的酶切时间、相关酶、Mg2+、dNTPs的用量、模板稀释倍数以及扩增循环数等6个重要影响因素的最优水平,探索适合其AFLP的反应体系。结果表明,400ngDNA用EcoRI(10U/μL)和MseI(10U/μL)各0.2μL进行酶切10min,完全满足预扩增和选择性扩增反应的要求,节省了试验成本和酶切时间;Mg2+的浓度是dNTPs浓度的5倍,扩增循环数为35,扩增效果最佳。模板稀释倍数对电泳条带结果影响较大,在预扩增反应中模板稀释5倍,选择性扩增反应
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