【摘 要】
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目的 运用实时定量qPCR(quantitative real-time PCR)检测结核分支杆菌耐异烟肼菌株和敏感株Ag85B和38 ku蛋白编码基因(fbpB、psts1)的表达水平,分析结核分支杆菌耐异烟肼株
【机 构】
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石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室,新疆,石河子,832002;新疆民族与地方高发病教育部重点实验室
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目的 运用实时定量qPCR(quantitative real-time PCR)检测结核分支杆菌耐异烟肼菌株和敏感株Ag85B和38 ku蛋白编码基因(fbpB、psts1)的表达水平,分析结核分支杆菌耐异烟肼株和敏感株的蛋白抗原在转录水平的差异性.方法 根据GenBank提供的序列,设计目的基因fbpB、psts1及内参基因Siga的特异引物,将fbpB、psts1及Siga 扩增片段克隆人载体pMD18-T simple,重组质粒经纯化及倍比稀释,应用实时定量PCR检测22株耐异烟肼菌株及25株敏感菌株(含H37Rv标准株)中fbpB、psts1的表达水平.结果 耐异烟肼菌株的fbpB表达水平为0.65±0.22,敏感菌株fbpB表达水平为0.36±0.13,差异有统计学意义(t=5.683,P＜0.01);耐异烟肼菌株的psts表达水平为13.63±4.16,敏感菌株psts1表达水平为9.86±2.79,差异有统计学意义(t=3.869,P＜0.01).结论 应用实时定量PCR检测耐异烟肼菌株的fbpB、psts 1的表达水平显著高于敏感菌株,为耐药结核的实验室诊断提供分子标识.
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