【摘 要】
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目的 探讨红霉素对香烟烟雾刺激的人巨噬细胞组蛋白去乙酰化酶2(H DAC2)表达的影响及其机制研究.方法 体外培养人类单核细胞系U937细胞,用佛波脂将其诱导分化为人巨噬细胞.按传统方法制备好香烟烟雾提取物(CSE)用于实验.将传代后的细胞分组:对照组、CSE组、红霉素+CSE组、HDAC的特异性抑制剂曲古霉素A(TSA)组.应用流式细胞仪检测人巨噬细胞活性氧(ROS)的含量;应用蛋白印迹实验(W
【机 构】
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目的 探讨红霉素对香烟烟雾刺激的人巨噬细胞组蛋白去乙酰化酶2(H DAC2)表达的影响及其机制研究.方法 体外培养人类单核细胞系U937细胞,用佛波脂将其诱导分化为人巨噬细胞.按传统方法制备好香烟烟雾提取物(CSE)用于实验.将传代后的细胞分组:对照组、CSE组、红霉素+CSE组、HDAC的特异性抑制剂曲古霉素A(TSA)组.应用流式细胞仪检测人巨噬细胞活性氧(ROS)的含量;应用蛋白印迹实验(Western blot)检测HDAC2和核因子κB(NF-κB)蛋白表达;通过酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度.结果 CSE可刺激人巨噬细胞释放ROS,具有浓度依赖性和时间依赖性;红霉素(1 mg/L)预孵育24 h可以增强1％ CSE抑制的人巨噬细胞HDAC2蛋白表达;红霉素(1 mg/L)预孵育24 h可以下调1％ CSE诱导的NF κB的活性;红霉素(1 mg/L)预孵育24 h可以抑制1％CSE诱导的TNF-α的合成和释放.结论 红霉素通过提高HDAC2蛋白表达进而抑制香烟烟雾诱导氧化应激导致的NF-κB活性增强和炎症介质TNF-α的合成和释放。
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