【摘 要】
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目的将孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp基因构建到pC-DGFP表达载体中,分析其在哺乳细胞株中的表达和定位情况。方法用PCR方法扩增Depp全长序列,插入真核表达载体pCDGFP中,将构建好的
【机 构】
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安徽医科大学生物学教研室,复旦大学遗传工程国家重点实验室
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目的将孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp基因构建到pC-DGFP表达载体中,分析其在哺乳细胞株中的表达和定位情况。方法用PCR方法扩增Depp全长序列,插入真核表达载体pCDGFP中,将构建好的质粒转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位;转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,利用GFP抗体进行Western blot检测。结果荧光显微镜观察表明,Depp蛋白主要分布在COS7细胞的胞质内,在细胞核周呈斑块状分布,在细胞核未见到明显表达,在HEK293T细胞中能有效表达。结论成功构建pCDGFP-Dep
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