【摘 要】
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目的: 初步建立人源性表皮黑素细胞膜蛋白质组学研究中的双向电泳分离技术,优化膜蛋白提纯方法,以提高细胞膜蛋白的分辨率、敏感度和可重复性.方法:采用固相pH梯度(IPG)等电
【机 构】
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第四军医大学西京医院皮肤科,西安,710032;北京武警总队医院皮肤科,北京,100027;西安交通大学生命科学与技术学院,西安,710049
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目的: 初步建立人源性表皮黑素细胞膜蛋白质组学研究中的双向电泳分离技术,优化膜蛋白提纯方法,以提高细胞膜蛋白的分辨率、敏感度和可重复性.方法:采用固相pH梯度(IPG)等电聚焦(IEF)为第一向、SDS-PAGE垂直电泳为第二向的双向电泳技术,对样品处理、水化等提取膜蛋白步骤进行了优化,与常规的提取膜蛋白的方法进行了比较.结果: 经优化提纯方法所得样品经3次重复实验,获得了高分辨率的双向电泳图,可分离蛋白质斑点数达500多个,蛋白分布比较均匀、范围广,蛋白点没有脱尾现象,与常规提取膜蛋白的方法比较具有显著优势.结论: 优化的蛋白提纯方法更适合细胞膜蛋白的蛋白组学研究.
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