【摘 要】
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目的:构建结核分枝杆菌MycP1蛋白原核表达系统。方法:构建pGEX-4T-1-Rv3883c重组质粒,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Westernblot法检测目标蛋白的表达情况。目标
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室
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目的:构建结核分枝杆菌MycP1蛋白原核表达系统。方法:构建pGEX-4T-1-Rv3883c重组质粒,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Westernblot法检测目标蛋白的表达情况。目标蛋白经亲和层析纯化后,以不同质量浓度MycP1作用于小鼠巨噬细胞ANA-1,48h后XTT法检测活细胞数,同时测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,以评价其细胞毒性。结果:成功构建pGEX-4T-1-Rv3883c质粒,该质粒能在大肠杆菌中表达,经鉴定,表达的融合蛋白为目标蛋白MycP1。该融
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