目的 建立从肠出血性大肠埃希菌O157∶H7中去除pO157的方法,构建pO157-cured突变株(O157Cu).方法分别将mini-R100系质粒pKP2368和mini-F系质粒pIndigoBAC-5通过电穿孔转化入O157∶H7 Sakai、EDL933、85-170、China2364、Arami505和Mida2684菌株中,筛选转化子,进行质粒图谱分析,PCR检测转化子中pKP2368和pIndigoBAC-5基因;并扩增pO157中的复制不相容区incB、incC和incD序列,DNA测序验证PCR结果.结果采用mini-F系质粒pIndigoBAC-5转化,菌株Sakai、EDL933、China2364、Arami505、Mida2684的pO157丢失率(分别为94.44%、52.08%、91.67%、96.67%和63.33%)明显高于采用mini-R100系质粒pKP2368转化时其pO157丢失率(分别为15.22%、9.26%、0、0、0),差异有显著性(P值分别为0.001);对于菌株85-170,无论采用pKP2368还是采用pIndigoBAC-5转化,其pO157丢失率均为0.菌株Sakai、China2364、Arami505、Mida2684的pO157中均含有incB、incC和incD序列,EDL933的pO157中含有incC和incD序列,而85-170的pO157中只含有incC序列.结论用携带与pO157相同活性复制子的R100系质粒pKP2368构建pO157-cured突变株,结果并不理想;但携带RepFIA区、含有incB、incC和incD序列的mini-F系质粒pIndigoBAC-5却适用于构建多种菌株的pO157-cured突变株,成功率高、重复性好.pO157中所含mini-F序列incB、incC和incD的存在情况可能与pO157丢失率有关。
大肠埃希菌O157∶H7的pO157-cured突变株构建
【摘 要】
：
目的 建立从肠出血性大肠埃希菌O157∶H7中去除pO157的方法,构建pO157-cured突变株(O157Cu).方法分别将mini-R100系质粒pKP2368和mini-F系质粒pIndigoBAC-5通过电穿孔转化入O157∶H7 Sakai、EDL933、85-170、China2364、Arami505和Mida2684菌株中,筛选转化子,进行质粒图谱分析,PCR检测转化子中pKP2
【机 构】
：
150001,哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学科卫生检验学教研室,中国疾病预防控制中心营养与食品安全所食源性疾病监控室
【出 处】
：
中华微生物学和免疫学杂志
【发表日期】
：
2004年24期
论文部分内容阅读
其他文献
目的:对半枫荷进行显微鉴别。方法:采用组织切面、粉末显微鉴别等方法。结果:半枫荷横切面韧皮部具含晶细胞,韧皮纤维束、韧皮薄壁细胞与韧皮射线略呈“井”字形排列;粉末的
菜蛾尽是广东省农业科学院农化中心研制的一种新型生物农药,治理抗性小菜蛾,表现出杀死速度比一般生物农药快,与目前使用的各类杀虫剂无交互抗性等特点。笔者于1998～1999年间
作为一名高中生,只有在对于学习有好奇心的时候,才能够使我们对于学习的热情有所激发,因此在我们学习的过程中应不断将对于知识的好奇心进行提升,并且将我们所学的知识融入到
近几年来，免耕地里出现了部份阔叶杂草难以防除的问题 (如通泉草、碎米荠等 )，使得免耕除草不彻底，也难以找出合适的好办法。 通过试验，在灭生性除草剂 (克无踪或农达 )中加
目的:以益肾活血清利为法组方通过中药含药血清观察中药对HK-2细胞(人肾近端小管上皮细胞)TEMT(肾小管上皮细胞向间质肌成纤维细胞转分化)过程中的信号因子表达的影响。方法:
2000年12月30日，中国人民解放军第四军医大学基础部李云庆等8位科教人员完成了痛信息传递和调控机制的研究。
本刊今年第二期的《沙龙》栏目中,刊载了北京开卷信息技术有限公司孙庆国总经理题为《大众阅读与出版细分》的文章,刊出后反响热烈。之后的4月10日,借孙庆国总经理太原讲座之
为加强消毒产品生产企业的监督管理工作,进一步规范消毒产品经营行为,确保广大消费者使用合格的消毒产品,山西省卫生厅卫生监督所于2007年6月至8月对山西省消毒产品生产企业
血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)是反映肝细胞功能的最常用指标。ALT在肝细胞损害时释放入血流,临床上主要用于肝脏疾病的诊断。目前,中华人民共和国从业人员预防性健康检查,肝