【摘 要】
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目的 观察体外受精(IVF)周期中24 h内不发生卵裂的第3天(D3)发育延缓胚的体外发育潜能,为建立人胚胎干细胞库提供新的材料来源.方法 通过囊胚序贯培养法将卵裂期发育延缓胚培
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心,华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科,华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科
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目的 观察体外受精(IVF)周期中24 h内不发生卵裂的第3天(D3)发育延缓胚的体外发育潜能,为建立人胚胎干细胞库提供新的材料来源.方法 通过囊胚序贯培养法将卵裂期发育延缓胚培养至囊胚,观察囊胚形成率及囊胚质量.用逐步logistic回归分析囊胚形成率与卵裂球数、卵裂球对称性及卵裂球碎片比率的相关性.用免疫外科法去除滋养细胞,将得到的原代克隆接种于小鼠胚胎成纤维细胞上,体外传代并鉴定.结果 120枚卵裂期发育延缓胚培养出囊胚22枚(囊胚形成率18.7%).第6天早期囊胚、囊胚、满囊胚、扩张胚、孵化胚及孵化后囊胚的比率分别为5.9%、23.5%、35.3%、23.5%、5.9%及5.9%.内细胞团分级及滋养外胚层分级均仅有1个为A级,其余均为B或C级.发育延缓胚的囊胚形成率与卵裂球数、卵裂球对称性相关,而与卵裂球碎片比率无关.获得内细胞团7个,原代克隆3个,成功培养出2株人类胚胎干细胞系(hESC),并具有hESC的生物学特性:碱性磷酸酶(AKP)、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)4、肿瘤排斥抗原(TRA)1-60、TRA-1-81呈阳性;悬浮培养可形成拟胚体;在严重免疫缺陷(SCID)小鼠体内可形成畸胎瘤;分别传45及35代后核型正常.结论 部分发育延缓胚可以发育为囊胚,从而可为建立人胚胎干细胞系提供新的材料来源.
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