μ型阿片受体对人表皮干细胞增殖与迁移的影响

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目的 观察μ型阿片受体的活化对体外培养的人表皮干细胞(hESCs)增殖与迁移的影响.方法 分离培养原代hESCs,整合素β1、细胞角蛋白19 (CK19)染色鉴定.取第2代hESCs分别用含1 nmol/L β-内啡肽的K-SFM培养基(A组)、含10 nmol/L纳洛酮及1 nmol/L β-内啡肽的K-SFM培养基(B组)以及单纯的K-SFM培养基(C组)进行培养;连续5d,采用噻唑蓝(MTT)法检测hESCs分裂增殖活性.于培养后24 h刮擦生长融合成片的hESCs,制备宽度为100 μm的体外单层hESCs缺损模型,模型制备后24、48、72、96 h,倒置相差显微镜下观察各组表皮创面愈合,并拍照记录,计算模型制备后72 h各组创面愈合率.结果 原代培养的hESCs贴壁后呈鹅卵石样生长.免疫荧光染色法检测第2代hESCs的整合素β1、CK19均呈阳性表达.分组培养后,MTT法测得第2~4天中A组hESCs分裂增殖活性均高于C组,B组低于C组,各组间差异有统计学意义(P<0.05).单层细胞缺损模型制备后24 h,各组均可见hESCs迁移越过创缘,其中A组越过创缘的细胞数多于C组,B组少于C组;模型制备72 h后,由Image-Pro Plus软件分析各组创面愈合率分别为A组(91.80±0.05)%、B组(79.40±0.06)%、C组(86.30 ±0.75)%,各组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 μ型阿片受体活化后可促进hESCs分裂增殖和迁移活动,并可能藉此参与皮肤多种代谢调控过程。

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