【摘 要】
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根据紫花苜蓿锌指蛋白MsZFN基因（GenBank登录号为EU624138）序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物,以紫花苜蓿cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段,将正反义片段
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,重庆大学生物工程学院,中国农业大学
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根据紫花苜蓿锌指蛋白MsZFN基因（GenBank登录号为EU624138）序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物,以紫花苜蓿cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建成含有发夹结构的RNAi载体pART-F-R。利用农杆菌介导方法,将pART-F-R转化到紫花苜蓿中,经过PCR检测,获得了3株转基因植株。经过RT-PCR检测,证明转基因植株中MsZFN基因表达量明显低于未转基因的植株。结果表明,已构建成功具有发夹结构的RNAi载体pAR
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