TaqManMGB探针实时荧光定量PCR用于中华按蚊kdr基因突变检测的研究

来源 :中国血吸虫病防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xumeg
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目的建立一种用于中华按蚊杀虫剂抗性相关kdr基因突变检测的实时荧光定量PCR方法。方法根据中华按蚊kdr基因序列及其L1014位点常见的突变类型设计一对引物和三条TaqMan MGB探针,对TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR反应体系和条件进行了优化,选择经测序鉴定后的6种中华按蚊kdr基因常见类型对该方法进行验证,并用该方法对50个实验室和113个现场中华按蚊样本进行检测。结果实时荧光定量PCR方法能对中华按蚊kdr基因6种不同的基因型进行检测,单管法可判断kdr基因L1014是否发生突变,双管法可对具体突变类型进一步鉴别。经检测,50个实验室样本均为野生型纯合体,而113个现场样本中,仅12个样本为野生型纯合体,其余101个样本均发生了L1014F或L1014C突变,突变频率为87.61%。结论TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR可用于中华按蚊kdr基因L1014位点突变的检测。
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