【摘 要】
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目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后
【机 构】
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宁夏医科大学总医院生物芯片工程研究中心,宁夏医科大学临床医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(No:81560474,81860470);宁夏高等学校优秀青年培育项目(No:NGY2018-91);宁夏高等学校一流学科建设资助项目(No:NXYLXK2017A05)
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目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后与目的基因连接,产物转化细菌感受态细胞,对阳性克隆测序行对比分析,构建miR-18a-3P过表达及干扰慢病毒载体,荧光法测定病毒滴定;倒置荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MDA-MB-231转染及筛选过程的转染效率,筛选最佳MOI值;qRT-PCR检测慢病毒转染后MDA-MB-231细胞内miR-18a-3P的表
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