【摘 要】
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目的 研究隔蛋白7(SEPT7)基因对人胶质瘤细胞系TJ899侵袭的抑制及其分子机制.方法 Transwell法和3-D Matrigel法、划痕实验和2-D Matrigel法观察转染SEPT7的TJ899胶 质瘤细胞
【机 构】
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天津医科大学总医院神经病学研究所神经肿瘤实验室
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目的 研究隔蛋白7(SEPT7)基因对人胶质瘤细胞系TJ899侵袭的抑制及其分子机制.方法 Transwell法和3-D Matrigel法、划痕实验和2-D Matrigel法观察转染SEPT7的TJ899胶 质瘤细胞侵袭、迁移能力变化,蛋白印记和免疫组织化学检测MMP2、MMP9、MT1-MMP、TIMP1和TIMP2的表达变化,蛋白印记和免疫荧光检测整合素αV β3的表达,应用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白tubulin-α结构的变化.结果 Transwell法和3-D Matrigel法观察转染SEPT7后T3899细胞的侵袭能力下降了59.86%、43.36%,划痕实验和2-D Matrigel法观察和迁移能力下降了65.45%、24.02%.转染SEF17后,MMP2、MMP9、MT1-MMP和整合素αV 83的表达分别下调了54.03%、39.13%、76.06%、53.09%,TIMP1和TIMP2的表达则上调了62.50%、77.78%.肿瘤细胞的微管蛋白Tubulin-α结构出现了重新分布,由高密度型变化为稀疏型,这种变化接近于正常的非肿瘤的细胞的微管蛋白Tubulin-α结构.结论 SEPT7基因可以抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力,其分子机制可能通过逆转MMPs/TIMPs的失衡状态,降低整合素αV 83的表达,以及改变细胞骨架tubulin-α的结构而实现的.SEPT7可作为胶质瘤基因治疗的重要候选基因.
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