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目的：建立套式聚合酶链反应法（nPCR）检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）中乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）。方法：根据HBV基因组DNA正负链上下游缺口序列，设计两套相对保守的引物，建立HBV cccDNA套式PCR，并用该法检测200例慢性乙型肝炎患者PBMC中HBV cccDNA。结果：该法检测200例慢性乙型肝炎患者，HBV cccDNA阳性率为60％。结论：套式PCR法简便、灵敏，可用于测定PBMC中HBV cccDNA。