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[摘 要]目的：建立高效液相色谱法测定长春西汀注射液的含量。方法：高效液相色谱法，色谱柱：Aglea XBP C18 4.6×250mm 5um；流动相：以甲醇-乙腈-碳酸铵溶液（取碳酸铵1.57g，加水溶解并稀释至1000ml，摇匀）（15：51：34）为流动相；流速为每分钟1.0ml；柱温为25℃；检测波长为280nm。结果：长春西汀线性为y=934.58x+4503.3，r=0.9999，溶液在0.31mg/ml～0.83mg/ml的浓度范围内线性关系良好；平均回收率为99.26%，RSD为0.74% （n=9），重复性RSD=0.09%；结论：该方法简便，重复性、线性好、准确度高，采用此方法能有效的长春西汀注射液含量。
[关键词]高效液相色谱法 长春西汀注射液 含量测定
中图分类号：TM121.1.3 文献标识码：B 文章编号：1009-914X（2016）07-0018-01
长春西汀注射液是脑血管扩张药，能抑制磷酸二酯酶的活性，增加血管平滑肌松弛的信使c-GMP的作用，选择性地增加脑血流量，此外还能抑制血小板凝集，降低人体血液粘度，增强红细胞变形力，改善血液流动性和微循环，促进脑组织摄取葡萄糖，增加脑耗氧量，改善脑代谢。此方法具有准确度高、耐用性好等特点，因此我们采用此高效液相色谱法测定含量。
1.仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1260高效液相色谱仪，梅特勒—托利多XS105DU十万分之一电子天平。
1.2 试药
长春西汀对照品：中国生物药品检验所（纯度：99.8%）；甲醇、乙腈：DIKMA（色谱纯）；水：誉衡药业股份有限公司；碳酸铵：天津科密欧化学试剂有限公司（分析纯）。
2.方法与结果
2.1 色谱条件【1】
色谱柱：Aglea Venusil XBP C18 4.6×250mm 5um；流动相：以甲醇-乙腈-碳酸铵溶液（取碳酸铵1.57g，加水溶解并稀释至1000ml，摇匀）（15：51：34）为流动相；流速为每分钟1.0ml；柱温为25℃；检测波长为280nm。理论板数按长春西汀峰计算应不低于7000，长春西汀与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
2.2 专属性试验
按照处方量称取辅料配制溶液，再取对照品、原料分别制成0.5mg/ml的溶液，分别注入液相议，记录色谱图。
结果：混合辅料在主峰位置没有色谱峰，因此辅料对含量测定结果没有干扰。此方法专属性较好。
2.3 线性试验
原料贮备液的制备：精密称取原料104.36mg置100ml量瓶中，用0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度，摇匀，即得。
精密量取原料贮备液各3ml、3.5ml、4ml、4.5ml、5ml、5.5ml、6ml、6.5ml、7ml、7.5ml、8ml分别置10ml量瓶中，用0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度，摇匀，即得。
测定 精密量取上述线性溶液各10ul分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以主峰峰面积为纵坐标，样品浓度为横坐标，进行线性回归分析，计算R值，
结果：根据试验数据所得？y=934.58x+4503.3，r=0.9999，溶液在0.31mg/ml～0.83mg/ml的浓度范围内线性关系良好。
2.4 准确度试验
对照品溶液的制备：精密称取对照品（含量：99.8%）12.86mg置25ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度摇匀，制成0.5mg/ml的溶液。
原料浓溶液的制备：精密称取原料（含量：99.7%）49.98mg置50ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度，摇匀，制成1mg/ml的溶液。
供试品溶液的制备：精密量取原料浓溶液5ml置10ml量瓶中，用0.01mol/L盐酸稀释定容至刻度摇匀，制成0.5mg/ml的溶液。
分别配制80%、100%、120%溶度的溶液：分别精密量取对照品溶液2ml，原料浓溶液3ml、4ml、5ml溶液分别置10ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸稀释定容至刻度摇匀，同法配制3份。
测定精密量取上述溶液各10μl？分别注入液相色谱仪，记录色谱图。计算回收率。
结果：平均回收率为99.26%，RSD为0.74%，准确度试验符合测定要求。
2.5 重复性试验
按供试品浓度配制成6份供试品溶液，按含量测定方法重复测定6次，测得平均值为100.14%，RSD%=0.09%，结果表明：HPLC法重复性好。
2.6 精密度试验
取供试品（批号：110927），由不同人员、用不同仪器分别制备6份供试品溶液，测定含量，结果：12次测定结果平均含量为101.73%，RSD为0.50%，精密度良好，符合测定要求。
2.7 样品含量测定
取三批中试供试品，精密量取本品适量，加0.01mol/L盐酸溶液并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取10？l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取长春西汀对照品适量，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，摇匀，作为对照品溶液。同法测定，按外标法以峰面积计算，即得【1】。结果分别为110927：99.46%；110928：98.44%；110929：99.77%。 三批样品的含量测定结果均在95.0%～105.0%之间。
3.讨论
通过方法学研究表明，HPLC法专属性强、线性好、准确度高、重复性好；结果表明此HPLC法可以更准确测定长春西汀注射液含量，建议采用此法测定长春西汀注射液含量。
参考文献
[1]《中国药典》，2010年版二部长春西汀注射液质量标准。
[关键词]高效液相色谱法 长春西汀注射液 含量测定
中图分类号：TM121.1.3 文献标识码：B 文章编号：1009-914X（2016）07-0018-01
长春西汀注射液是脑血管扩张药，能抑制磷酸二酯酶的活性，增加血管平滑肌松弛的信使c-GMP的作用，选择性地增加脑血流量，此外还能抑制血小板凝集，降低人体血液粘度，增强红细胞变形力，改善血液流动性和微循环，促进脑组织摄取葡萄糖，增加脑耗氧量，改善脑代谢。此方法具有准确度高、耐用性好等特点，因此我们采用此高效液相色谱法测定含量。
1.仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1260高效液相色谱仪，梅特勒—托利多XS105DU十万分之一电子天平。
1.2 试药
长春西汀对照品：中国生物药品检验所（纯度：99.8%）；甲醇、乙腈：DIKMA（色谱纯）；水：誉衡药业股份有限公司；碳酸铵：天津科密欧化学试剂有限公司（分析纯）。
2.方法与结果
2.1 色谱条件【1】
色谱柱：Aglea Venusil XBP C18 4.6×250mm 5um；流动相：以甲醇-乙腈-碳酸铵溶液（取碳酸铵1.57g，加水溶解并稀释至1000ml，摇匀）（15：51：34）为流动相；流速为每分钟1.0ml；柱温为25℃；检测波长为280nm。理论板数按长春西汀峰计算应不低于7000，长春西汀与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
2.2 专属性试验
按照处方量称取辅料配制溶液，再取对照品、原料分别制成0.5mg/ml的溶液，分别注入液相议，记录色谱图。
结果：混合辅料在主峰位置没有色谱峰，因此辅料对含量测定结果没有干扰。此方法专属性较好。
2.3 线性试验
原料贮备液的制备：精密称取原料104.36mg置100ml量瓶中，用0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度，摇匀，即得。
精密量取原料贮备液各3ml、3.5ml、4ml、4.5ml、5ml、5.5ml、6ml、6.5ml、7ml、7.5ml、8ml分别置10ml量瓶中，用0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度，摇匀，即得。
测定 精密量取上述线性溶液各10ul分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以主峰峰面积为纵坐标，样品浓度为横坐标，进行线性回归分析，计算R值，
结果：根据试验数据所得？y=934.58x+4503.3，r=0.9999，溶液在0.31mg/ml～0.83mg/ml的浓度范围内线性关系良好。
2.4 准确度试验
对照品溶液的制备：精密称取对照品（含量：99.8%）12.86mg置25ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度摇匀，制成0.5mg/ml的溶液。
原料浓溶液的制备：精密称取原料（含量：99.7%）49.98mg置50ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶解稀释定容至刻度，摇匀，制成1mg/ml的溶液。
供试品溶液的制备：精密量取原料浓溶液5ml置10ml量瓶中，用0.01mol/L盐酸稀释定容至刻度摇匀，制成0.5mg/ml的溶液。
分别配制80%、100%、120%溶度的溶液：分别精密量取对照品溶液2ml，原料浓溶液3ml、4ml、5ml溶液分别置10ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸稀释定容至刻度摇匀，同法配制3份。
测定精密量取上述溶液各10μl？分别注入液相色谱仪，记录色谱图。计算回收率。
结果：平均回收率为99.26%，RSD为0.74%，准确度试验符合测定要求。
2.5 重复性试验
按供试品浓度配制成6份供试品溶液，按含量测定方法重复测定6次，测得平均值为100.14%，RSD%=0.09%，结果表明：HPLC法重复性好。
2.6 精密度试验
取供试品（批号：110927），由不同人员、用不同仪器分别制备6份供试品溶液，测定含量，结果：12次测定结果平均含量为101.73%，RSD为0.50%，精密度良好，符合测定要求。
2.7 样品含量测定
取三批中试供试品，精密量取本品适量，加0.01mol/L盐酸溶液并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取10？l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取长春西汀对照品适量，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，摇匀，作为对照品溶液。同法测定，按外标法以峰面积计算，即得【1】。结果分别为110927：99.46%；110928：98.44%；110929：99.77%。 三批样品的含量测定结果均在95.0%～105.0%之间。
3.讨论
通过方法学研究表明，HPLC法专属性强、线性好、准确度高、重复性好；结果表明此HPLC法可以更准确测定长春西汀注射液含量，建议采用此法测定长春西汀注射液含量。
参考文献
[1]《中国药典》，2010年版二部长春西汀注射液质量标准。