猪瘟病毒C株(脾淋毒)全长cDNA分子几个突变位点的重组改造

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采用RT-PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从试验感染兔脾组织的总RNA中得到了猪瘟病毒(CSFV) C株全长cDNA的3个待改造片段,分别克隆于pMD18-T载体后进行测序.用重组技术分别从前期构建的5'半长cDNA或3'半长cDNA中替换F1、F3和F51,构建成2个新的半长cDNA,进一步连接成新的全长cDNA,经测序证实全长cDNA中3个致死性突变位点均得到改正.初步鉴定证明该全长cDNA具有感染性.为猪瘟病毒C株反向遗传操作系统的建立奠定了基础.
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