【摘 要】
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对体外产生的和内源性刺激产生的活性氧(ROS)诱发人类11号染色体(Hchr11)基因突变规律及其突变谱进行研究.体外羟自由基(@OH)用过氧化氢(H2O2)与Fe2+反应产生,并用化学发光(C
【机 构】
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军事医学科学院放射医学研究所,美国哥伦亚大学放射生物研究中心
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对体外产生的和内源性刺激产生的活性氧(ROS)诱发人类11号染色体(Hchr11)基因突变规律及其突变谱进行研究.体外羟自由基(@OH)用过氧化氢(H2O2)与Fe2+反应产生,并用化学发光(CL)进行相对定量分析;内源性ROS用佛波醇酯(PMA)刺激人外周血白细胞产生,并用CL和特异性抗氧化物检测和鉴定;用包含单条Hchr11的人-中国仓鼠卵巢细胞(AL)为靶,经CD59表面抗原抗体筛选突变细胞克隆,研究ROS诱发的Hchr11基因突变;突变克隆细胞DNA用Hchr11上5种标志基因引物进行多重PCR分析,结合琼脂糖凝胶电泳绘制基因突变谱.结果表明,体外ROS可诱发Hchr11基因突变,且@OH诱发基因突变的能力明显强于H2O2,两者的突变谱也存在明显差异;PMA可刺激人外周血白细胞产生大量的多种ROS,并诱发Hch11基因突变,突变谱综合了H2O2和@OH的所有特征;一些抗氧化物对内源性产生的ROS诱发Hchr11基因突变有明显抑制作用.提示体外和内源性ROS可诱发Hchr11基因突变,不同的活性氧分子诱发的基因突变可能具有特异性.
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