【摘 要】
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目的 克隆胃粘膜上皮细胞GES-1细胞中S100钙结合蛋白A2 cDNA,构建pSMPUW-Neo-S100A2重组表达载体,转染胃癌细胞SGC-7901后,研究S100A2蛋白的表达变化,及其对胃癌细胞增殖、凋亡和迁徙能力的影响.方法 应用重组技术构建pSMPUW-Neo-S100A2融合蛋白表达载体,质粒经测序正确后,western-blot检测S100A2蛋白表达水平变化,MTT检测细胞增殖能力、流式细胞仪检测细胞凋亡、划痕实验检测细胞迁徙能力的改变.结果 构建的pSMPUW-Neo-S100A2表
【机 构】
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中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,辽宁沈阳,110122;中国医科大学附属盛京医院胃肠营养外科,辽宁沈阳,110122
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目的 克隆胃粘膜上皮细胞GES-1细胞中S100钙结合蛋白A2 cDNA,构建pSMPUW-Neo-S100A2重组表达载体,转染胃癌细胞SGC-7901后,研究S100A2蛋白的表达变化,及其对胃癌细胞增殖、凋亡和迁徙能力的影响.方法 应用重组技术构建pSMPUW-Neo-S100A2融合蛋白表达载体,质粒经测序正确后,western-blot检测S100A2蛋白表达水平变化,MTT检测细胞增殖能力、流式细胞仪检测细胞凋亡、划痕实验检测细胞迁徙能力的改变.结果 构建的pSMPUW-Neo-S100A2表达质粒,转染SGC-7901细胞后,发现S100A2蛋白表达水平升高,胃癌细胞出现增殖能力下降、凋亡升高和迁徙能力下降的现象.在细胞增殖能力检测中,表达质粒转染细胞后第1天和第2天的细胞增长率分别为18％和32％,而对照组对应为27％和56％,差距有统计学意义(P＜0.05).结论 S100 A2转染胃癌SGC-7901细胞后使该细胞的增殖能力下降、细胞凋亡程度升高和迁徙能力下降,可以作为一个生物标记物对其进行筛选.
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