胶质瘤细胞中ADAR2 mRNA前体选择性剪接模式的分析

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目的:比较胶质瘤细胞U87、U251、A172和正常星形胶质细胞HA1800中ADAR2 mRNA前体选择性剪接模式的差异。方法:RFPCR产物测序检测胶质瘤细胞和正常胶质细胞中GluR2 Q/R位点的A-to-I编辑水平。根据前期研究鉴定出的选择性剪接位点设计特异性引物,RT-PCR方法检测胶质瘤细胞U87、U251、A172和正常星形胶质细胞HA1800中不同剪接转录本的相对表达量,比较胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中ADAR2 mRNA前体剪接模式的差异。结果:胶质瘤细胞中GluR2 Q/R位点的A-to-I编辑水平明显下降。RT-PCR检测到在胶质瘤细胞中,Exon 1a(+)/1a(-)、Exon 2(+)/2(-)的比值在胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中无显著性差异。Exon 5a(+)/5a(-)的比值明显高于正常星形胶质细胞HA1800。结论:Exon 5a位点的剪接在胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中有显著性差异,Exon 5a(+)转录本的表达增加可能是导致胶质瘤细胞中ADAR2编辑活性下降的原因。
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