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目的开发高纯度达托霉素的分离纯化工艺。方法以聚合物纳米微球为载体，对洗脱条件进行优化，再进一步采用结晶的方法进行纯化。结果选择PSRPC-300型聚合物纳米微球为层析填料，上样量为0．5g／100g填料，流速控制为5mL／min，以体积分数为30％和40％的乙醇进行洗脱，收集40％乙醇洗脱液，浓缩后加入丙酮进行结晶，过滤，干燥得到纯度大于98．5％的达托霉素。结论建立了高纯度达托霉素的的分离纯化工艺，流程简单、可行，为该产品产业化开发提供基础。