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目的 探讨胆固醇在高脂高胆固醇诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)发生发展过程中的动态作用.方法 将SD 大鼠随机分为CON 组(正常饮食)、HFCO 组(20％脂肪)、HFC1 组(20％脂肪+1％胆固醇)、HFC2组(20％脂肪+2％胆固醇)及HFC5 组(20％脂肪+5％胆固醇).饲喂第4、6、8 及12 周末,采血并取肝脏组织;采用油酸(oleic acid,OA)及OA+低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)诱导人肝脏正常细胞(HL-7702)5 d 后,构建NASH 模型,同时以RPMI1640 培养基(含10％FBS)为对照组.分别检测大鼠血浆及HL-7702 细胞培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)的含量,大鼠肝脏组织及HL-7702 细胞中总胆固醇(total cholesterol,TC)及甘油三酯(triglyceride,TG)的含量;HE 及Masson 染色观察肝脏组织病理改变;油红0 及菲律宾菌素染色观察HL-7702 细胞内脂滴及胆固醇含量;Western blot 法检测活性n-固醇调节元件结合蛋白-2(n-sterol regulatory element binding protein 2,n-SREBP-2)、低密度脂蛋白受体(low-density lipoproteins receptors,LDLR)及3-轻基3-甲基戊二酰辅酶 A 还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGCR)的蛋白表达水平.结果 动物水平:12周末,与CON 组比较,HFC2组、HFC5 组血浆中ALT、AST及肝脏组织中TC、TG 含量均显著升高(P均＜0.05),肝细胞脂肪变性、气球样变性及纤维化病变明显,HFC2 组、HFC5 组大鼠NASH 诱导成功;经Western blot 分析,4、6及8 周末,HFC2 组、HFC5 组较CON 组LDLR 蛋白表达水平均显著升高(P均＜0.05),12周末,HFC5 组较CON 组LDLR 蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);4、6 及8 周末,各组n-SREBP-2 蛋白表达水平与CON 组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),12 周末,HFC2 组、HFC5 组较CON 组n-SREBP-2 蛋白表达水平均显著升高(P均＜0.05);4、6 及12 周末各组HMGCR 蛋白表达水平与CON 组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),8 周末,HFC5 组较CON 组HMGCR 蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).细胞水平:OA+LDL-C 组较对照组及OA组细胞内胆固醇含量、n-SREBP-2及HMGCR蛋白表达水平均显著升高(P均＜0.05);OA组及OA+LDL-C组较对照组LDLR 蛋白表达水平均显著降低(P均＜0.05).结论 胆固醇摄入量和摄入时间的长短与NASH 肝损伤呈正相关;胆固醇可诱导肝细胞高表达LDLR,促使胆固醇进入肝脏增加,抑制HMGCR 调控的内源性胆固醇合成;随着肝内胆固醇堆积增多,肝细胞LDLR 表达减少,使肝内胆固醇相对不足,反馈性调节n-SREBP-2 及HMGCR表达升高,打破肝脏胆固醇代谢稳态,促进了 NASH 的发生发展.