水貂生长激素cDNA的克隆与序列分析

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从水貂脑垂体中分离提取总RNA,经过RT-PCR分别扩增出水貂生长激素前体肽和成熟肽cDNA.PCR产物经凝胶回收纯化,克隆到载体pGEM-T,然后转化感受态细胞DH5α.在含X-gal、IPTG的LB(Amp+)平板上筛选阳性克隆,提取质粒作限制性酶切鉴定后,对目的片段进行测序.结果表明,RT-PCR扩增出的2个cDNA片段碱基数分别为713bp和780bp,用DNAsis 2.5软件进行分析表明,此扩增序列与GenBank中发表的水貂生长激素cDNA 100%相同.前体肽编码区由651bp组成,编码2
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