miRNA-143对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响及机制研究

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目的探讨miRNA-143对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响及机制。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测宫颈癌组织、癌旁组织及宫颈癌C-33A、He La、Ca Ski细胞中miRNA-143的表达水平。将miRNA-143 mimics、miRNA-143 inhibitor及HIF-1α-siRNA转染至He La细胞中,未转染的作为对照组。Western blot检测转染48 h后miRNA-143 mimics组、miRNA-143 inhibitor组和对照组的HIF-1α蛋白表达水平。将miRNA-NC+miRNA-143 mimics、Wt-HIF-1α+miRNA-143 mimics、Mut-HIF-1α+miRNA-143 mimics转染He La细胞,检测荧光素酶活性;后续实验分为对照组、miRNA-143 mimics组及HIF-1α-siRNA组,各组细胞转染48 h后,CCK8试验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测Ki-67、cleaved caspase 3、β-catenin、cyclin D1蛋白表达水平。结果宫颈癌组织中miRNA-143的表达水平明显低于癌旁组织(P﹤0.01),人宫颈癌Ca Ski细胞中的miRNA-143表达水平高于人宫颈癌He La细胞和C-33A细胞(P﹤0.05)。miRNA-143 mimics组的HIF-1α蛋白表达水平低于对照组,miRNA-143 inhibitor组的HIF-1α蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。WtHIF-1α+miRNA-143 mimics组的荧光素酶活性低于miRNA-NC+miRNA-143 mimics组和Mut-HIF-1α+miRNA-143mimics组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);而Mut-HIF-1α+miRNA-143 mimics组与miRNA-NC+miRNA-143 mimics组的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。miRNA-143 mimics和HIF-1α-siRNA组的细胞存活率及Ki-67、β-catenin、cyclin D1蛋白表达水平均低于对照组,细胞凋亡率及cleaved caspase 3蛋白表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 miRNA-143在宫颈癌中低表达,miRNA-143可通过下调HIF-1α的表达及抑制Wnt/β-catenin信号通路,抑制人宫颈癌He La细胞增殖并促进其凋亡。
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