马尾松银松素合酶基因转化双子叶植物表达载体的构建及鉴定

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以马尾松为材料,在获得马尾松银松素合酶基因的基础上,构建了该基因转化双子叶植物的表达载体,该表达载体含有35S启动子和NOS终止子,能启动基因在双子叶植物中高效地表达。设计并合成分别含有BglⅡ和BstEⅡ酶切位点的上下游引物,通过PCR反应扩增出含有该酶切位点的银松素合酶基因eDNA全序列,酶切后连接到pCAMBIA1301植物表达载体上。经PCR鉴定、酶切分析及DNA测序证实cD-NA片段大小、序列以及读码框的正确性。最后通过电击将表达载体转化农杆菌LBA4404,为进一步研究银松素合酶基因的功能奠定
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