【摘 要】
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目的:在大肠杆菌pMAL-P2x系统中表达anti-rabies MBP-ScdsFv融合蛋白,酶切获得目的蛋白ScdsFv,进行纯化、鉴定及简单活性分析.方法:利用DNA重组技术,将全长的ScdsFv蛋白基因
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目的:在大肠杆菌pMAL-P2x系统中表达anti-rabies MBP-ScdsFv融合蛋白,酶切获得目的蛋白ScdsFv,进行纯化、鉴定及简单活性分析.方法:利用DNA重组技术,将全长的ScdsFv蛋白基因克隆至原核表达载体pMAL-p2x中,重组质粒转化大肠杆菌E.coli ER2566,IPTG诱导表达.表达产物经Xa酶切后,经Ni柱、Amylose Resin亲和层析进行纯化,SDS-PAGE和Western blot对其进行鉴定,ELISA检测其结合活性.结果:成功地构建了重组质粒pMAL-ScdsFv,经诱导表达、蛋白酶切、亲和纯化后获得目的蛋白.ELISA检测其具有抗原特异结合活性,其热稳定性有显著提高.结论:抗狂犬病毒ScdsFv蛋白具有良好的结合活性和生物学活性稳定性,可作为候选分子用于狂犬病的防治研究.
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