【摘 要】
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[目的]探讨环状RNA(circRNA)circXPO1通过miR-5195-3p/RTKN轴调控结直肠癌SW620细胞增殖和凋亡的机制.[方法]应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot测定circXPO1、miR-5195-3p、RTKN mRNA和RTKN蛋白的表达.SW620细胞分为si-NC组、si-circXPO1 组、miR-NC 组、miR-5195-3p 组、si-circXPO1+anti-miR-5195-3p 组、si-cir-cXPO1+pcDNA-RT
【机 构】
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广州市第一人民医院,广东广州510180
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[目的]探讨环状RNA(circRNA)circXPO1通过miR-5195-3p/RTKN轴调控结直肠癌SW620细胞增殖和凋亡的机制.[方法]应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot测定circXPO1、miR-5195-3p、RTKN mRNA和RTKN蛋白的表达.SW620细胞分为si-NC组、si-circXPO1 组、miR-NC 组、miR-5195-3p 组、si-circXPO1+anti-miR-5195-3p 组、si-cir-cXPO1+pcDNA-RTKN 组,依次转染siRNA-NC(si-NC)、siRNA-circXPO1(si-circXP01)、mimic NC(miR-NC)、miR-5195-3p mimic、si-circXPO1、miR-5195-3p inhibitor(anti-miR-5195-3p)、si-circXPO1和 pcDNA-RTKN.运用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、流式细胞术检测SW620细胞增殖、凋亡.生物信息学分析与双荧光素酶报告实验测定circXPO1与miR-5195-3p、miR-5195-3p 与 RTKN 的靶向关系.[结果]与癌旁组织比较,结直肠癌组织中circXPO1(4.55±0.30 vs 4.55±0.30)、RTKN mRNA(3.27±0.29 vs 1.00±0.04)和 RTKN 蛋白(0.51±0.06 vs 0.21±0.03)表达水平升高,miR-5195-3p(0.34±0.03 vs 1.00±0.06)表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).Si-circXPO1组结直肠癌SW620细胞中circXPO1表达水平、细胞活性(0.37±0.03 vs 0.72±0.05)均比 si-NC 组低,凋亡率(25.91%±2.51%vs 6.73%±0.65%)比 si-NC 组高,差异有统计学意义(P<0.05).Cir-cXPO1 靶向调控miR-5195-3p的表达,miR-5195-3p靶向调控RTKN的表达.MiR-5195-3p组结直肠癌SW620细胞中RTKN 蛋白、细胞活性(0.43±0.04 vs 0.74±0.05)比 miR-NC 组减少,凋亡率(21.01%±2.11%vs 7.17%±0.54%)比 miR-NC 组增加,差异有统计学意义(P<0.05);si-circXPO1+anti-miR-5195-3p 组和 si-circXPO1+pcDNA-RTKN 组 RTKN 蛋白表达水平、细胞活性(0.34±0.03、0.38±0.04、0.17±0.02)均高于 si-circXPO1 组,凋亡率(13.83%±1.21%、10.19%±0.82%、27.53%±2.65%)均低于si-circXPO1组,差异有统计学意义(P<0.05).[结论]CircXPO1通过miR-5195-3p/RTKN轴促进结直肠癌SW620细胞增殖,和抑制其凋亡.
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