【摘 要】
：
采用PCR方法扩增猪Viperin蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体pET32a,转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白得到表达,分子质量约为4
【机 构】
：
江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京农业大学动物医学院
论文部分内容阅读
采用PCR方法扩增猪Viperin蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体pET32a,转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白得到表达,分子质量约为40 ku.进一步优化蛋白表达条件为:IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导5h.采用His标签单抗对重组蛋白进行Western blot鉴定表明蛋白具有良好的抗原性.将蛋白质纯化后免疫新西兰大白兔,间隔14 d免疫4次,并采集血清.用间接ELISA方法测定血清抗体效价,结果表明,经过4次免疫血清抗体效价达到1:409600,间接免疫荧光检测出现特异荧光,表明其能与Viperin蛋白发生反应.本试验为研究Viperin的功能、建立特异的检测方法奠定了基础.
其他文献
我省的“两型社会”建设已经形成较完整的体制机制体系,但城市化进程中的城市管理,工业化进程中的技术创新、组织创新与文化创新,市场化进程中的各种市场制度创新,特别是资本
为了探讨不同硒源对黄曲霉毒素B1 (AFB1)致鸡肝损伤的作用,选用1日龄健康罗丝308肉仔鸡120羽,随机分为4组:空白对照组(饲喂基础日粮)、AFB1对照组(基础日粮+100 μg/kg的AFB1
为探明我国鸡群中产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)不同毒素型分布特征及携带主要致病毒素基因和对饲用抗菌素的抗药谱,于2013年7月至2014年5月间从四川等7省17个肉
本文从提供可追溯猪肉产品的供给方出发,在四川省成都市生猪养殖户、屠宰企业的问卷调查基础上,从供给主体的规模、政府行为对生产者参与可追溯行为的意愿影响度等方面做实证
为有效缓解南方夏季高温热应激,探讨了风机不同安装角度对肉牛血清生长相关激素和免疫指标的影响.从牛场选择24头年龄、体重相近、性别相同、生长状况良好的锦江黄牛,随机分
为了探讨并比较电击驱赶应激反应对法国皮特兰猪和中国东北民猪这2个品种的纯种猪肉品质和生理生化指标的影响,选用的这2个品种的育肥猪均为氟烷基因显性纯合子型(HalNN),避
采用乙醇加热回流法提取了云南建水县麻疯树Jatropha curcas不同部位(叶、树皮及种子)中的挥发性成分,利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对其提取物化学成分进行了解析,分离鉴
选择10日龄鹌鹑300只,公母各半,随机分成5组,每组60只(公母各30只),以功率为15 W的中波紫外灯为紫外线光源,以每天连续照射1、2、4和6 h(紫外线照射剂量分别为1.4、2.8、5.6
以Leptin基因作为控制猪产仔性状和生长性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术在合作猪群体中进行单核苷酸多态性(SNPs)检测,分析Leptin基因的遗传多样性及突变位点基因型频率与基
为获得副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白中的穿孔素前体蛋白P2 (OmpP2)基因的表达产物,利用特异性引物以HPS血清13型江西分离株扩增ompP2基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测