【摘 要】
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目的建立ploy（A）聚合酶加尾的SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测血清miR-375,并进行临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-375ploy（A）聚合酶加尾逆转录
【机 构】
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南通大学附属东台医院检验科,南通大学医学院免疫教研室
【基金项目】
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江苏省盐城市医学科技发展计划项目(YK20130103)
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目的建立ploy（A）聚合酶加尾的SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测血清miR-375,并进行临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-375ploy（A）聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR GreenⅠ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-375的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-375表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103-106 copy/μL范围内
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