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通过PCR方法分别从pGL3-Mx1载体上和pcDNA3．1（＋）载体上扩增猪Mx1启动子和BGHpolyA；利用重叠PCR方法获得猪源的Cre重组酶基因，并从pGCFRT2NeoR上用XholⅠ和SalⅠ酶切得到FRT2NeoR盒子。将上述4个片段利用SOE-PCR及T1DNA连接酶连接，然后利用原核表达载体pET28a（＋）构建Cre表达载体Mx1—Cre-BGHpolyA—FRT2neoR。用Lipofectamine^TM2000介导转染猪成纤维细胞，G418筛选阳性细胞，PCR鉴定。结果表明，成