【摘 要】
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建立家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的快速检测技术,有利于病害的早期诊断.选择家蚕核型多角体病毒极早期基因pe38为靶基因设计特异性检测引物,对不同浓度BmNPV基因组DNA模板及含
【机 构】
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云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自,661101
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建立家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的快速检测技术,有利于病害的早期诊断.选择家蚕核型多角体病毒极早期基因pe38为靶基因设计特异性检测引物,对不同浓度BmNPV基因组DNA模板及含有pe38的重组质粒pMD(R) 18-pe38标准品进行PCR检测,结果扩增出BmNPV 370 bp的特异性片段,病毒多角体的最低检测浓度为4.86×103 mL-1,标准质粒的最低检测量为0.7 pg.将BmNPV感染家蚕幼虫后不同时间取其血淋巴用于PCR检测方法的验证,结果表明,接种病毒多角体浓度为4.86×108 mL-1时,感染36 h后取样的幼虫血淋巴中能扩增出370 bp的病毒特异条带,可检出病毒的时间随添毒浓度的递减而延迟.该检测方法具有较好的特异性和灵敏度.
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