【摘 要】
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目的 基于HMGB1/TLR4/NF-κB通路探讨参芪抑瘤方联合顺铂对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及相关免疫指标的影响。方法 50只SPF级雄性KM小鼠,采用随机数字表法取10只小鼠作为空白组,其40只小鼠复制H22肝癌荷瘤小鼠模型,模型复制成功后将模型小鼠随机分为模型组、顺铂组(2.5×10-3 g·kg-1)、参芪抑瘤方中药组(27.03 g·kg-1)、参芪抑瘤方(27.03 g·kg-1)
【基金项目】
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兰州市科技局2015年人才创新创业项目扶持基金项目(2015-RC-24):新药“复方参芪抑瘤胶囊”的研制,负责人:吴红彦; 甘肃省发改委2013年第十一批建设项目计划(2305142201):自主创新能力建设项目,负责人:吴红彦;
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目的 基于HMGB1/TLR4/NF-κB通路探讨参芪抑瘤方联合顺铂对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及相关免疫指标的影响。方法 50只SPF级雄性KM小鼠,采用随机数字表法取10只小鼠作为空白组,其40只小鼠复制H22肝癌荷瘤小鼠模型,模型复制成功后将模型小鼠随机分为模型组、顺铂组(2.5×10-3 g·kg-1)、参芪抑瘤方中药组(27.03 g·kg-1)、参芪抑瘤方(27.03 g·kg-1)联合顺铂组(2.5×10-3 g·kg-1),每组10只,治疗13天,测定抑瘤率、脾指数和胸腺指数;苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,HE)观察肿瘤病理学变化;流式细胞术检测脾组织中CD4+T、CD8+T细胞水平;实时荧光定量PCR(Realtime PCR,RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中高迁移率族蛋白B1(High mobility group protein,HMGB1)/TOLL样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)/核因子κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路相关的基因与蛋白表达。结果 (1)与空白组相比,模型组小鼠平均体质量及小鼠脾指数、胸腺指数、CD4+T细胞水平以及CD4+T/CD8+T值均显著降低、CD8+T细胞水平升高(P<0.05);(2)与模型组相比,各治疗组小鼠平均瘤质量降低(P<0.05),瘤体积减小(P<0.05),体质量升高(P<0.05),中药组和联合组小鼠脾指数、胸腺指数、CD4+T细胞水平以及CD4+T/CD8+T比值均升高,CD8+T细胞水平降低,且中药组治疗效果显著(P<0.05),小鼠肿瘤组织中HMGB1、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA与蛋白表达均降低,且联合组效果显著(P<0.05);(3)与顺铂组相比,联合组小鼠肿瘤组织中HMGB1、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05);(4)与中药组相比,联合组小鼠肿瘤组织中HMGB1、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05)。结论 参芪抑瘤方联合顺铂能有效抑制H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长,提高相关免疫指标,其机制可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路活化有关。
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