短发夹RNA抑制高迁移率蛋白A2基因表达后对垂体生长激素腺瘤细胞生物学行为的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:poloya
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 观察RNA干涉后高迁移率蛋白A2(HMGA2)在垂体生长激素(GH)腺瘤细胞中表达的变化,探讨HMGA2基因表达的抑制对GH腺瘤细胞增殖、凋亡和侵袭性的影响.方法 构建针对人HMGA2基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,瞬时转染GH腺瘤细胞.用Western blot法观察转染24 h后HMGA2蛋白表达水平,经细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)测定、流式细胞仪(FCM)检测及Transwell小室检测转染后GH腺瘤细胞增殖、凋亡及侵袭.结果 HMGA2-shRNA组HMGA2蛋白表达水平与空白对照组比较下降45.58%,与scrambled组比较下降40.98%,差异有统计学意义(p<0.05).细胞增殖反应结果显示实验组细胞增殖率显著低于对照组(P<0.05).细胞凋亡率的结果显示与空白对照组、scrambled组比较,HMGA2-shRNA组的细胞凋亡率明显增加[(18.32±1.73)%比(7.32±1.06)%、(9.21±1.12)%,P<0.05].体外侵袭实验显示GH腺瘤细胞侵袭力受到明显抑制(P<0.05).结论 靶向HMGA2基因的shRNA可以有效抑制垂体GH腺瘤细胞的增殖和侵袭力,并促进细胞的凋亡。

其他文献
目的 探讨重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)双基因共转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合纳米羟基磷灰石/重组类人胶原基/聚乳酸复合支架材料(nHA/RHLC/PLA)支架构建新型骨组织工程复合体用于修复自体桡骨缺损。方法首先构建兔1.5cm桡骨缺损模型,将体外培养BMSCs经基因转染后与nHA/RHLC/PLA支架复合构建骨组织工程复合体。分别设立:双
期刊
为展示我国外科各专业领域近年来的新进展、新成果,中华医学会中华实验外科杂志编委会定于2013年8月9日一11日在西安召开2013中国实验外科暨肿瘤外科论坛。本次会议将邀请外科学界知名专家做专题演讲。凡参会者均颁发国家继续教育学分证书和中华医学会论文证书。现将征集论文的有关事宜通知如下:
期刊
目的 观察乌司他丁(UTI)对食管癌手术后患者应激性高血糖的影响.方法 60例食管癌手术后确诊合并应激性高血糖的患者随机分为2组,其中对照组(C组,n=30)接受常规胰岛素降血糖治疗及其他综合治疗,联用UTI组(UTI组,n=30)在对照组治疗方法的基础上加用UTI.术后第1、3、5天检测空腹血糖(BG)、空腹胰岛素(INS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及白细胞介素-6(IL-6)的水平,计
我们通过RNA干扰使Ezrin基因沉默并观察其对乳腺癌细胞MCF-7恶性表型的影响.一、材料与方法1.材料:胎牛血清、DMEM、Trizol试剂、细胞株MCF-7,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测试剂盒、PCR产物回收试剂盒,质粒pSIREN-DNR-DsRed-Express,BamH Ⅰ、Sal Ⅰ、EcoR Ⅰ、T4连接酶、Ezrin抗体和β-肌动蛋白(β-actin)抗体等,胶回收
期刊
目的 观察红花对HSC-T6细胞间质胶原酶及Ⅰ型胶原基因表达的影响.方法 以不同浓度的红花(1.0、0.5 g/L)作用于培养的肝星状细胞株HSC-T6细胞48 h,收集细胞,提取总RNA;用逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定间质胶原酶(MMP13)及Ⅰ型胶原的基因表达水平.结果 MMP13基因表达水平在红花(1.0、0.5 g/L)两组分别为0.63±0.10、0.40±0.07,而
目的 使用超声检查对轻微胸腰段骨折患者脊柱后方韧带复合体(PLC)进行评估,了解超声对脊柱PLC的诊断意义和其影像学特点.方法 对21名诊断为胸腰段骨折的患者胸腰段PLC进行超声检查,检查结果由包括2名脊柱外科医师和1名超声医师组成,对超声影像资料进行评估,同时对比相应患者超声影像与核磁影像差异.结果 21名患者韧间/棘上韧带内均发现异常回声,其中3名患者被诊断为棘上韧带断裂;85.7%的患者在损
目的 观察唑来膦酸(ZOL)对人胃癌耐阿霉素(ADM)细胞株SGC-7901/ADR侵袭和黏附的影响,探讨ZOL是否具有逆转该细胞株对ADM的耐药作用及其机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法检测1×10-4 mol/L的ZOL联合0.5 mg/L的ADM对SGC-7901/ADR细胞黏附作用的影响;Transwell实验分析上述浓度的ZOL和ADM对细胞侵袭力的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA
目的 观察不同雄激素水平大鼠与大鼠海绵体神经型一氧化氮合酶(nNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的关系,探讨其临床意义.方法 选取40只SD雄性大鼠,随机分为正常对照(NC)组10只,去势组30只,常规去势造模后分别于接受不同浓度的十一酸睾酮灌胃(20、10 mg/kg)和生理盐水灌胃.4周后,采用免疫组织化学和Western blot法检测各组阴茎海绵体组织中nNOS和eNOS的表达.
目的 检测肺特异性蛋白X(LUNX) mRNA在Ⅰ期非小细胞肺癌纵隔(N2)淋巴结中的表达,探讨其与微转移及预后等相关性.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测160例Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织及N2淋巴结中LUNX mRNA表达,分析与肿瘤大小、病理类型及预后等相关性.结果 LUNX mRNA在肿瘤组织中均表达,在良性疾病淋巴结中未见表达,160枚N2淋巴结中17枚
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF) mRNA干扰对胶质母细胞瘤的治疗意义.方法 应用RNA干扰技术,对胶质母细胞瘤细胞株U251进行了VEGF mRNA干扰、辅以6Gy的放射剂量照射、化疗处理.在干扰前后用流式细胞技术、噻唑蓝(MTT)比色法及倒置显微镜观察等技术对U251细胞株的细胞周期、凋亡率、抑制率、细胞形态进行检测.结果 胶质母细胞瘤U251细胞在转染VEGF小干扰RNA(siRNA)