【摘 要】
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为进一步完善G13结构域的原核表达系统,人工合成编码G13的基因片段,PCR扩增后克隆于原核表达载体pET28a中,构建的重组质粒pET28a-G13转化于E.coli BL21(DE3)中。另外对pET28a
【机 构】
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安徽大学生命科学学院安徽省生态工程与技术重点实验室;
【基金项目】
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安徽省高校省级自然科学研究重点项目:抗菌肽高效重组表达与结构功能关系研究(KJ2010A025)
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为进一步完善G13结构域的原核表达系统,人工合成编码G13的基因片段,PCR扩增后克隆于原核表达载体pET28a中,构建的重组质粒pET28a-G13转化于E.coli BL21(DE3)中。另外对pET28a-G13进行突变,改变其G13片段N端上游处的融合头的电荷数,转化于E.coli BL21(DE3)中。构建pThiohisA突变体并与pET28a-G13共转化于E.coli BL21(DE3)中。用诱导剂诱导所构建的各个工程菌,然后比较A600值变化及蛋白表达量,分析不同的融合头对G13毒性抑制效果,发现融合头对G13毒性抑制效果与其净负电荷数及酸性氨基酸的相对位置有关。
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