【摘 要】
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目的建立基于纳升电喷雾离子化质谱技术(nano ESI-MS)检测登革病毒的方法。方法采用生物工程技术,合成Ⅱ型登革病毒(DENV-Ⅱ)NS1蛋白特异性肽段作为识别标志,通过优化实验条
【机 构】
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哈尔滨医科大学公共卫生学院; 中国检验检疫科学研究院;
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2016YFC1200905);国家科技重大专项(2018ZX10713002-001-008)
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目的建立基于纳升电喷雾离子化质谱技术(nano ESI-MS)检测登革病毒的方法。方法采用生物工程技术,合成Ⅱ型登革病毒(DENV-Ⅱ)NS1蛋白特异性肽段作为识别标志,通过优化实验条件,建立基于nano ESI-MS技术的DENV-ⅡNS1蛋白特异性肽段的检测方法;借助特异性胰蛋白酶酶解技术,实现对DENV-ⅡNS1蛋白的检测验证。结果在2.5 kV电压、以甲醇、水按体积比6∶4比例并加入0.1%甲酸作为蛋白稀释液条件下,应用nano ESI-MS技术可成功检测出DENV-ⅡNS1蛋白特异性标志性肽段,灵敏度达10 ng/ml。结论 nano ESI-MS技术灵敏度高,操作简单,可在敞开式大气压环境下实现检测。该方法的建立为扩展nano ESI-MS技术应用范围提供了新思路。
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