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目的：为了将胆固醇氧化酶应用于低胆固醇系列食品开发和胆固醇测定中，研究优化了菌株Rhodococcus SR.R14-2发酵生产胆固醇氧化酶（COX）的工艺条件。方法：通过测定比较COX酶活力，利用全自动发酵罐小试生产COX，研究发酵温度、pH、乳化剂、通风量和搅拌速率等因素对COX产量的影响。结果：Rhodococcus SP．R14-2的生物生长量和产酶是部分偶联的，胞外COX酶的合成高峰比生物量高峰滞后约12h。发酵过程中分段控制搅拌转速和通气量分别为：发酵前10h，200r／min和4L／min；