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研究沉默信息调节因子1(SIRT1)基因沉默对间充质干细胞(MSCs)受照后Nod样受体蛋白3(NLRP3)和IL-1β表达的影响,探讨SIRT1激活剂——白藜芦醇的辐射防护作用及其机理。
方法将MSCs分为空白对照组、单纯照射组、RNA干扰组、白藜芦醇组和RNA干扰+白藜芦醇组。采用酶联免疫吸附测定、Western blot和RT-PCR等方法检测IL-1β、SIRT1和NLRP3在蛋白和mRNA水平的表达。
结果辐射可导致MSCs细胞外IL-1β分泌水平明显升高,给予白藜芦醇后,细胞IL-1β分泌水平较单纯照射组显著下降(t=21.68,P<0.01),NLRP3和IL-1β mRNA水平较单纯照射组明显降低(t=14.44,P<0.01;t=12.35,P<0.01),SIRT1基因沉默后,NLRP3和IL-1β的mRNA水平回升至单纯照射组水平(t=14.86,P<0.01;t=11.12,P<0.01),即使再给予白藜芦醇,NLRP3和IL-1β的mRNA水平仍明显高于白藜芦醇组(t=11.31,P<0.01;t=10.54,P<0.01)。
结论SIRT1基因沉默减弱了白藜芦醇对辐射诱导的NLRP3和IL-1β的抑制作用,说明白藜芦醇可能通过激活SIRT1、抑制NLRP3、降低IL-1β的表达,从而减轻辐射引起的细胞损伤。