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目的分析血流感染血培养常见的革兰阳性细菌分布及耐药性。方法收集2012年10月—2015年9月武汉大学人民医院住院患者血液标本2 063份,分离革兰阳性菌株,并采用最低抑菌浓度(MIC)法进行药敏实验,按2015年美国临床实验标准委员会(NCCLS)指导原则的标准判定实验结果,计算出所测细菌对抗菌药物的耐药率(R)和敏感率(S)。结果血培养分离出革兰阳性菌1 051株,其中葡萄球菌754株(71.74%),肠球菌属96株(9.18%);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)的检出率分别为47.86%、65.00%;MRSA对阿米卡星、克林霉素、环丙沙星、利福平、庆大霉素、四环素、妥布霉素的耐药率均在55%以上,对红霉素的耐药率高达92%,但对复方新诺明、奎奴普丁/达福普汀保持着较好的敏感性;MRSCN对呋喃妥因、利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素耐药率良好,为0~3%;屎肠球菌(EFM)耐药率普遍高于粪肠球菌(EFA)。未发现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺及氯霉素耐药的金黄色葡萄球菌,未发现对复方新诺明、奎奴普丁/达福普汀及氯霉素耐药的肠球菌属。结论血流感染血培养中革兰阳性菌存在严重耐药,MRSA、MRSCN、屎肠球菌耐药情况尤为严峻,应加强耐药菌株的监测,合理用药。