【摘 要】
：
目的:根据抗CD33-sc Fv序列构建CD33-CAR修饰的NK92细胞,探讨其对CD33~+急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞的杀伤作用。方法:通过基因合成以及分子克隆技术获
【机 构】
：
天津科技大学生物工程学院; 武汉科技大学生命科学与健康学院;
【基金项目】
：
国家自然科学青年基金资助项目(No.31401170)~~
论文部分内容阅读
目的:根据抗CD33-sc Fv序列构建CD33-CAR修饰的NK92细胞,探讨其对CD33~+急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞的杀伤作用。方法:通过基因合成以及分子克隆技术获得抗CD33-CAR片段,然后将其构建到慢病毒载体上,进行慢病毒包装,将得到的慢病毒转染NK92细胞,用流式细胞术检测细胞转染效率并通过嘌呤霉素筛选得到稳定表达抗CD33-CAR的细胞系CD33-CAR-NK92,利用钙黄绿素释放法检测该细胞的杀伤作用,ELISA法检测细胞因子IFN-γ分泌的变化。结果:成功构建p CDH-CD33-CAR重组慢病毒质粒,慢病毒转导后约18.7%的NK92细胞表达CD33-CAR(命名为CD33-CARNK92细胞),嘌呤霉素筛选后表达CD33-CAR的NK92细胞比例约86.3%。CD33-CAR-NK92细胞对CD33~+AML细胞MOLM-13的杀伤作用明显高于未被基因修饰的NK92细胞(P<0.01),而两者对CD33-肿瘤细胞JURKAT的杀伤作用没有明显差异(P>0.05)。效靶比为2∶1共培养6 h后,经CD33-CAR修饰的NK92细胞相比未被基因修饰的NK92细胞IFN-γ的分泌水平明显升高[(190.97±11.52)vs(88.41±2.75)pg/ml,P<0.01]。结论:CD33-CAR-NK92细胞能特异性识别CD33抗原并杀伤CD33~+AML细胞,其杀伤作用显著高于未被基因修饰的NK92细胞,为进一步开展靶向CD33的CAR-NK92细胞治疗AML的临床转化奠定了实验基础。
其他文献
同江市青河种羊场饲养东北细毛羊种羊365只，其中母羊205只，公羊15只，育成羊40只，羔羊405只，2005年4月30日先后发病，到5月10日前死亡哺乳母羊32只，5月10日注射兰州生物药厂生产的羊四
1993年,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所在国内首次采用普通种鸡群(BWEL)为原材料,经疫病净化试验、生物学敏感性试验和选育培育试验等方法,用隔离器培育我国BWEL-SPF种鸡基
猪流感(SI)是由猪流感病毒(SIV)引起的一种急性、高度接触传染性的群发性猪呼吸道疾病,是猪的主要免疫抑制病之一;临床以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭为特征,发病率高达
粗糙集和概念格是两种不同的知识发现和数据挖掘有效工具，已被广泛应用于许多领域。在对粗糙集和概念格基本理论研究基础上，提出了利用扩展粗糙集模型对概念格近似使其得以改进
零碰撞区跳频序列集能够有效减轻准同步跳频通信系统中多址干扰,具有广阔应用前景.文中首先分析分段交织构造零碰撞区跳频序列集需要满足的条件,然后提出一种约束跳频间隔最
2004年7月12～13日,宝清县宝清镇建设村一肉鸭养殖专业户饲养的1700只小鸭发病,两天共死亡56只.7月14日向县畜禽治疗中心求助,请求迅速诊治.我中心遂前往,经过5d治疗,除8只死亡
交泰丸加味治疗室性早搏６８例张文华近几年来，笔者应用交泰丸加味治疗室性早搏６８例，取得较满意疗效。１临床资料６８例中门诊病人４３例，住院病人２５例；男４０例，女２８例；年龄最小４２岁，最大７４岁，平均５２岁；病程最长２５年，最
目的本研究是对英文前瞻性随机对照研究(RCT)的一项Meta分析,比较一站式LC联合术中经内镜逆行性胰胆管造影术(ERCP)和二站式LC联合术前ERCP方法治疗胆囊结石合并胆总管结石的
针对工业企业技术创新能力测度问题,分析现有工业企业技术创新能力测度方法的优缺点;在传统ELECTRE方法和模糊测度等理论的基础上构建基于关联的ELECTRE(R-ELECTRE)方法,并将
阔盘吸虫病是由阔盘属的数种吸虫寄生于宿主的胰管中所引起的疾病,亦称胰吸虫病.此外,病原偶可寄生于胆管和十二指肠.本病除发生于牛、羊等反刍动物外,还可感染猪、兔、猴和