论文部分内容阅读
目的
探讨p21活化激酶4(PAK4)对乳腺癌细胞增殖和干细胞特性的影响及其作用机制。
方法：采用乳腺癌MCF-7细胞构建短发卡RNA(shRNA)-NC和shRNA-PAK4慢病毒稳定细胞系，采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测PAK4 mRNA表达水平；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖；采用Transwell分析细胞侵袭能力；采用微球体形成实验分析乳腺癌细胞的干细胞特性；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测乳腺癌干细胞标志分子乙醛脱氢酶1(ALDH1)和Oct-4的表达。
结果与shRNA-NC细胞比较(1.71±0.14)，shRNA-PAK4细胞中PAK4的mRNA表达水平明显下调(0.57±0.05)，差异有统计学意义(t＝3.725，P<0.05)；与shRNA-NC细胞比较(1.76±0.14)，shRNA-PAK4细胞的增殖能力显著下降(0.66±0.04)，差异有统计学意义(t＝3.572，P<0.05)；Transwell结果显示shRNA-PAK4细胞的侵袭能力(58.06±7.73)较shRNA-NC细胞(92.18±11.35)显著下降，差异有统计学意义(t＝2.850，P<0.05)；Western blot结果显示，与shRNA-NC细胞比较(1.48±0.12、2.16±0.18)，shRNA-PAK4细胞中ALDH1和Oct-4的蛋白表达水平明显下降(0.40±0.04、0.77±0.06)，差异有统计学意义(t＝4.361、3.505，P<0.05)。
结论PAK4可通过正向调控ALDH1和Oct-4的表达改变乳腺癌细胞的干细胞特性，从而参与乳腺癌细胞的增殖和侵袭。