云南栘(木衣)SRAP-PCR反应体系的建立及引物筛选

来源 :云南农业大学学报(自然科学) | 被引量 : 0次 | 上传用户:chen19881220
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[目的]建立云南栘(木衣)SRAP-PCR最佳反应体系并筛选SRAP-PCR多态性引物组合.[方法]以木里、澜沧和盈江3个天然群体的云南栘(木衣)嫩叶为试验材料,采用改进后的CTAB法提取云南栘(木衣)基因组DNA.利用L16(45)的正交设计对TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、模板DNA及引物5种因素进行优化,建立云南栘(木衣)SRAP-PCR最佳反应体系,并从100对引物组合中筛选SRAP-PCR多态性较高的引物组合.[结果]云南栘铱SRAP-PCR最佳反应体系(25 μL):TaqDNA聚合酶0.5 U,Mg2+2.5 mmol/L,dNTPs 0.25mmol/L,模板DNA 80 ng,引物0.8 μmol/L.各因素对云南栘(木衣)SRAP-PCR反应体系的影响由小到大排列为:dNTPs<模板DNA<TaqDNA聚合酶<Mg2+<引物.利用木里、澜沧和盈江3个天然群体的云南栘(木衣)基因组DNA对建立的体系进行验证,筛选出的20对引物组合共扩增出212个位点,其中多态性位点187个,占比为88.21%.[结论]建立了稳定可靠的云南栘(木衣)SRAP-PCR体系,为后续云南栘(木衣)遗传多样性的研究提供支持.
其他文献
[目的]研究氮肥配施生物炭对坡耕地烤烟/青贮玉米套作生物量和光合特性的影响.[方法]以云烟87烤烟品种和中玉335青贮玉米品种为试验材料,在坡度为10°的模拟小区进行套种试验.设置氮肥水平(N)和生物炭(B)2个因素:3个氮肥施用量(烤烟+青贮玉米)分别为0+0(N0)、52.5 kg/hm2+100 kg/hm2(N1)和105 kg/hm2+200 kg/hm2(N2);2个生物炭施用量分别为不添加生物炭(B0)和添加3%生物炭(每100 kg土添加3 kg生物炭,B1).测定烤烟和玉米成熟期的质体色
[目的]初步探明连作年限对不同类型植烟土壤的化学性状和酶活性指标的影响以及连作条件下烤烟产量和品质的变化趋势,探讨不同类型土壤对连作的响应.[方法]2019年在云南省昆明市寻甸县和石林县的定位试验点,以红壤和紫色土的轮作(CK)、连作1、3和5年的烟田为研究对象,测定烟株的农艺性状、经济性状、烟叶化学成分指标以及根际土壤的化学性状和主要酶活性.[结果](1)连作导致烤烟有效叶数、叶面积指数和产量等指标呈下降趋势,连作3年内下降不明显,连作5年则显著下降(P<0.05).(2)烟叶总糖和还原糖含量随连作年限
以昌7-2和应用EMS对昌7-2诱变选育的无叶舌新种质—10H045为父本,以郑58、WX201620和WX201623表型差异显著的3个自交系为母本进行杂交,研究无叶舌种质10H045对F1代植株叶片生长态势和产量的影响.结果 表明,以10H045为父本杂交的F1代,其茎叶夹角和叶向值均比以昌7-2为父本杂交的F1代的植株要小,且差异显著;穗3叶以上的叶片上冲特性尤为突出,植株塔型结构明显,有利于提高杂交种产量.无叶舌种质10H045为父本的组合,其产量均比以昌7-2为父本的组合产量高,组合WX2016
[目的]筛选促进柑橘砧木资阳香橙盆栽幼苗生长的丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF),为柑橘菌根种苗应用提供参考,也为利用菌根柑橘种苗抑制柑橘黄龙病探索新途径.[方法]采用盆栽试验,利用资阳香橙幼苗接种从广西土壤分离纯化获得的15株AMF菌株,研究不同AMF对根系的侵染及对植株的促生效应.[结果]15株AMF均能与资阳香橙根系形成共生关系.其中,黄雷德克囊霉1(Redeckera fulvum 1)对植株根系的侵染率最高,达到81.27%;脆无梗囊霉(Acaulo
[目的]研究屠宰日龄对大恒肉鸡生长性能及肉品质的影响,并探讨这些性状之间的相关性,为优质肉鸡的生产提供参考.[方法]选取1日龄雌性大恒肉鸡200只,分别于60、90、120、150、180、240和300 d共7个日龄屠宰10只体质量相近的个体,记录活体质量、胸肌质量和腹脂质量,测定胸肌尺寸、pH值、肉色、滴水损失、蒸煮损失和剪切力,并分析生长性能和肉品质之间的相关性.[结果]随着日龄的增长,大恒肉鸡的活体质量、胸肌质量、腹脂质量及胸肌尺寸逐渐增加.日增质量在第60~90天达到最大,胸肌质量的增速在第60
[目的]研究外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)对猕猴桃植株生长及其果实品质的影响,以期为猕猴桃生产及其品质改善提供理论支持.[方法]以翠玉猕猴桃为材料,从开花前期至膨果期每隔20 d叶面喷施质量浓度10~50mg/L的外源ALA,共喷施3次,测定其叶绿素含量(SPAD)、净光合速率、叶面积、叶厚、茎粗、维生素C含量、单果质量、可溶性固形物含量和可滴定酸含量等指标.[结果]10~40 mg/L外源ALA能不同程度地提高猕猴桃的生长和品质指标,除叶长以外,均以30 mg/L ALA处理的效果最好;与对照相比,30
玉米直链淀粉是重要的食品和工业原料,高直链淀粉性状的产生受多种酶和基因-环境等因素的共同影响.玉米ae基因(amylose extender)突变导致子粒中直链淀粉含量增高、子粒表面皱缩、淀粉颗粒呈不规则形状、尺寸不均匀且表面基质蛋白增多,用于玉米育种后获得的品种直链淀粉含量升高,产量显著降低.通过将显性Ae突变体与16份优质玉米自交系杂交,对F1代植株进行开花期、株型、产量性状调查,分析F1代子粒总淀粉、直链淀粉的含量.结果 表明,Ae突变体与不同的自交系杂交,F1代直链淀粉含量及产量的变化存在明显差异
以197份玉米自交系为试材,人工加速老化后进行标准发芽试验,检测种子耐储性相关表型性状,结合平均分布于玉米基因组的SNP标记进行关联分析,挖掘关联SNP位点和候选基因.结果 表明,共检测出8个与相对发芽势(RGE)、相对发芽指数(RGI)、相对活力指数(RVI)和相对简易活力指数(RSVI)等性状呈显著关联的SNP位点(P<0.0001),分布于染色体bin1.08、bin3.08、bin4.03、bin4.05和bin6.05区域;PZE-104063000、PZE-104064763和PZE-1060
[目的]建立樟叶越桔遗传转化体系,并为其重要次生代谢产物熊果苷及其衍生物的生产提供材料参考.[方法]以樟叶越桔组培苗幼嫩茎段为外植体,采用木本植物培养基(WPM)培养,研究不同质量浓度的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和噻苯隆(TDZ)搭配对樟叶越桔茎段愈伤组织的诱导,并分析不同细胞分裂素及其质量浓度对愈伤组织再分化不定根的影响,获得樟叶越桔茎段愈伤组织诱导和愈伤组织再分化不定根的理想配方.[结果]樟叶越桔茎段愈伤组织诱导最佳培养基配方为WPM+2,4-D 2.0 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+蔗
以238份玉米自交系为试验材料,设置两个种植密度水平,研究不同密度对农艺性状的影响,筛选用于评价玉米自交系耐密性的指标并建立耐密性评价体系.结合关联分析找到相应的SNP标记,将标准化值变异系数较大的指标作为耐密性指标.结果 表明,单株产量降幅、秃尖长差值、ASI差值可作为玉米自交系耐密性评价指标.利用建立的评价体系从本试验材料中筛选10个耐密性材料,包括B283-1、良玉S122、丹黄212、L201、D25-2-1-1-1、pr07007-1、pr07438-2-2-1、黄早四、SN7135和Y32-1