【摘 要】
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目的:克隆小鼠肌肉特异性激酶( muscle - specific kinase,MuSK)基因,原核表达、纯化MuSK蛋白.方法:获取编号AY360453的小鼠肌肉特异性激酶的基因编码序列进行优化和合成,将
【机 构】
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广西大学生命科学与技术学院,广西科学院广西工业生物技术研究中心
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目的:克隆小鼠肌肉特异性激酶( muscle - specific kinase,MuSK)基因,原核表达、纯化MuSK蛋白.方法:获取编号AY360453的小鼠肌肉特异性激酶的基因编码序列进行优化和合成,将得到的目的基因构建于大肠杆菌表达载体pQE30中,获得重组表达载体pQE30 - MuSK,转化至大肠杆菌菌株M15中表达,SDS - PAGE凝胶电泳检测是否有目的蛋白条带,MuSK酶联免疫分析试剂盒检测目的蛋白的免疫活性及其含量.结果:获得MuSK基因1.4kb片段,成功构建pQE30 - MuSK原核表达载体,MuSK蛋白在大肠杆菌中成功表达,相对分子质量约为48kDa,Elisa试剂盒测得样品中MuSK的含量约为8.2pmol/L.结论:利用分子克隆技术建立了MuSK基因的原核表达系统,为更深入的研究其在重症肌无力中的作用打下基础.
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