【摘 要】
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目的:探讨甘草总黄酮通过调控丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/核转录因子κB（NF-κB）信号通路对脂多糖（LPS）诱导的人牙龈成纤维细胞（HGF）炎症反应的抑制作用。方法:体外分离培养原代HGF,以5μg·ml-1 LPS处理后，采用CCK-8实验检测0,1.5,3,6,12,24μg·ml-1甘草总黄酮对HGF细胞活力的影响，筛选出甘草总黄酮适合的剂量和作用时间。体外培养原代HGF,随机分为对照
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目的:探讨甘草总黄酮通过调控丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/核转录因子κB（NF-κB）信号通路对脂多糖（LPS）诱导的人牙龈成纤维细胞（HGF）炎症反应的抑制作用。方法:体外分离培养原代HGF,以5μg·ml-1 LPS处理后，采用CCK-8实验检测0,1.5,3,6,12,24μg·ml-1甘草总黄酮对HGF细胞活力的影响，筛选出甘草总黄酮适合的剂量和作用时间。体外培养原代HGF,随机分为对照组（不进行任何药物处理）、LPS组(5μg·ml-1)、甘草总黄酮低剂量(6μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)组、甘草总黄酮高剂量(12μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)组、甘草总黄酮高剂量(12μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)+C16-PAF(MAPK激活剂，4μmol·L-1)组。采用CCK-8实验、划痕实验分别检测各组细胞活力和迁移率；酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒检测各组细胞炎性因子白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、环氧合酶-2（COX-2）释放水平；免疫印迹法检测各组细胞IL-6、IL-8、COX-2、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、趋化因子2（CCL2）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-8（MMP-8）及MAPK/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:甘草总黄酮可提高LPS诱导的HGF细胞活力，与药物剂量及作用时间呈正相关。与对照组相比，LPS组细胞活力和迁移率显著降低（P＜0.05）,IL-6、IL-8及COX-2的释放量、IL-6、IL-8、COX-2、ICAM-1、CCL2、MMP-2及MMP-8蛋白表达、p-细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）/ERK1/2、p-c-Jun N-末端激酶（JNK）/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65及肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达显著升高（P＜0.05）。与LPS组相比，甘草总黄酮低、高剂量+LPS组细胞活力和迁移率均显著升高（P＜0.05）,IL-6、IL-8及COX-2的释放量、IL-6、IL-8、COX-2、ICAM-1、CCL2、MMP-2及MMP-8蛋白表达、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65及TNF-α表达均显著降低（P＜0.05）,且甘草总黄酮低、高剂量组间差异有统计学意义（P＜0.05）。与甘草总黄酮高剂量+LPS组相比，甘草总黄酮高剂量+LPS+C16-PAF组细胞活力和迁移率显著降低（P＜0.05）,IL-6、IL-8及COX-2的释放量、IL-6、IL-8、COX-2、ICAM-1、CCL2、MMP-2及MMP-8蛋白表达、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65及TNF-α显著升高（P＜0.05）。结论:甘草总黄酮可通过抑制MAPK/NF-κB信号通路而降低炎性因子表达，并下调ICAM-1、CCL2、MMP-2、MMP-8蛋白表达，抑制LPS诱导的炎症，促使HGF生长和迁移。
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