【摘 要】
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为建立蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)十二种血清型(血清6、8、10、11、13、14、17、18、19、20、22与23型)特异性实时荧光定量RT⁃PCR(qRT⁃PCR)检测方法,根据GenBank公布的十二种BTV血清型毒株的基因节段2序列,选择高度保守区域,设计每种BTV血清型的扩增引物与TaqMan探针;以十二种血清型BTV参考毒株的cDNA为模板,进行引物的筛选,建立BTV血清型特异性qRT⁃PCR检测方法;对检测方法的灵敏度、特异性与重复性进行验证,分别以含有50、10
【机 构】
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云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室,云南农业大学
【基金项目】
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国家自然科学基金(项目号:31760744)题目:蓝舌病病毒新血清型毒株感染与基因重配特性的研究,国家重点研发计划(项目号:2017YFC1200505),题目:蓝舌病等虫媒性动物疫病现场快速检测与实验室鉴定技术研究,公益性行业(农业)科研专项(项目号:201303035),题目:重要牛羊虫媒病毒病防控关键技术研究与应用,云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目(项目号:2017HB055)。
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为建立蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)十二种血清型(血清6、8、10、11、13、14、17、18、19、20、22与23型)特异性实时荧光定量RT⁃PCR(qRT⁃PCR)检测方法,根据GenBank公布的十二种BTV血清型毒株的基因节段2序列,选择高度保守区域,设计每种BTV血清型的扩增引物与TaqMan探针;以十二种血清型BTV参考毒株的cDNA为模板,进行引物的筛选,建立BTV血清型特异性qRT⁃PCR检测方法;对检测方法的灵敏度、特异性与重复性进行验证,分别以含有50、10
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ur/E
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ur
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