一测多评法测定银屑配方颗粒中4种生物碱的含量

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目的建立一测多评法同时测定银屑配方颗粒中4种生物碱(苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱)的HPLC法,为该方的物质基础研究提供实验依据。方法在优化样品前处理工艺的基础上,建立了同时测定银屑配方颗粒中4种生物碱的HPLC外标法,色谱柱为Wondersil C18(4.6mm×250mm,5μm);以甲醇-25mmol·L-1磷酸盐缓冲液(pH值为3.0)(7∶93)为流动相;流速为0.8mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为220nm。以苦参碱为参比物质,测定槐果碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的相对校正因子(RCF),利用RCF计算待测成分的含量,并与外标法进行比较,对一测多评法进行可行性验证。结果供试品前处理工艺为:料液比1∶5,超声时间17min,苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱质量浓度分别在2.832 8362.20(r=0.999 8),1.0535134.85(r=0.999 9),0.580 374.28(r=0.999 8)和0.863 6110.54μg·mL-1(r=0.999 8)范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.7%(RSD=3.38%),100.8%(RSD=2.87%),99.9%(RSD=2.28%)和101.0%(RSD=2.90%)。以苦参碱为内参物,槐果碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的相对校正因子分别为2.087,1.365和0.931,外标一点法和一测多评法测定结果相对误差均小于2%。结论一测多评法可同时测定银屑配方颗粒中4种生物碱的含量,该法操作简便可行、重复性好、准确度高。
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