【摘 要】
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目的:通过腹主动脉插管灌注胶原酶分离胰腺星状细胞(pancreaticstellatecell,PSC),建立简单易行的PSC分离方法,并对PSC进行培养和鉴定。方法:大鼠腹主动脉插管灌注后,经胶原
【基金项目】
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江苏省自然科学基金资助(BK2006241)
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目的:通过腹主动脉插管灌注胶原酶分离胰腺星状细胞(pancreaticstellatecell,PSC),建立简单易行的PSC分离方法,并对PSC进行培养和鉴定。方法:大鼠腹主动脉插管灌注后,经胶原酶消化、Nycodenz密度梯度离心,分离得到PSC;通过观察细胞形态、胞质内脂滴和免疫细胞化学方法检测结蛋白(desmin)、神经胶质酸纤维蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)、α平滑肌肌动素(α-smoothmuscleactin,α-SMA)的表达来鉴定PSC。结果:腹主动脉灌注法分离得到PSC,产率、活力和纯度分别为(:15.3±4.6)×103/g体重(﹑95.0±3.5)%﹑﹥80%;培养24h后大多数细胞已贴壁,呈星状或多角形,48h后表达desmin、GFAP,并在96h后表达α-SMA。结论:通过腹主动脉灌注法较容易分离得到PSC,其产率、活力和纯度较高,经鉴定后能够满足体外实验要求。
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