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以pEKH-F3质粒为模板。PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选。获得含有F3的PQE80L重组载体的克隆。提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板。PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区,PE40。然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体。转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40。结果显示。大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量大概占菌体总体蛋白量的20%。通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转