2. 您的位置
3. 首页
4. 期刊论文
5. 新孢子虫NcSAG1与NcSRS2基因的原核表达与纯化

新孢子虫NcSAG1与NcSRS2基因的原核表达与纯化

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wuzx5858

【摘 要】

：

PCR扩增新孢子虫NcSAGl与NcSRS2基因，将其构建至原核表达载体pET28a（＋），转化大肠杆菌BL21菌株。对重组表达质粒pET28a／SRS2与pET28a／SAG1IPTG的诱导浓度和诱导温度等条件进行了摸索，

【作 者】

：

史茜 员丽娟 季新成 于学辉 

【机 构】

：

新疆出入境检验检疫局

【出 处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

2013年10期

【关键词】

：

新孢子虫 NcSAG1 NcSRS2 原核表达 WESTERN BLOTTING ELISA Neospora caninurrz  NcSAG1  NcSRS 

【基金项目】

：

国家质量监督检验检疫总局科研资助项目（2009IK011,2011IK017）

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文 赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

PCR扩增新孢子虫NcSAGl与NcSRS2基因，将其构建至原核表达载体pET28a（＋），转化大肠杆菌BL21菌株。对重组表达质粒pET28a／SRS2与pET28a／SAG1IPTG的诱导浓度和诱导温度等条件进行了摸索，确定蛋白最佳诱导时间分别为5、3h，IPTG浓度均为0．8mmol／L。经组氨酸标记Ni2＋柱纯化后获得的蛋白纯度均大于93．5％，蛋白质量浓度分别为1．23、1．1g／L。经Westernblotting检测证明表达的蛋白具有较好的特异性。用纯化后pET28a／SRS2、pET28a

其他文献

牛源犬新孢子虫NcSRS9基因的生物信息学分析及原核表达

为了解新孢子虫NcSRS9基因的生物信息学特性,本试验对牛源犬新孢子虫吉林株NcSRS9基因进行分子克隆,利用生物信息学软件对该基因进行编码蛋白等电点、信号肽、跨膜区、糖基化

期刊

犬新孢子虫NcSRS9基因生物学信息原核表达Neospora caninum SRS9 gene biological information p

细粒棘球蚴SmadC蛋白及其MH2结构域酵母双杂交载体的构建及自激活鉴定

从重组克隆载体pMD18-T—egsmadC中扩增细粒棘球蚴egsmadC基因及其MH2编码序列，将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中，经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后，PEG／LiAe法转

期刊

smadC基因MH2结构域酵母双杂交自激活smadC gene MH2 domain yeast two-hybrid system self-a

脂质体转染胚盘细胞制备携pEGFP—C2基因的转基因鹌鹑

利用脂质体转染第X期胚盘细胞的方法将外源质粒pEGFP—C2经脂质体包裹后注射到鹌鹑种蛋X期胚盘下腔，处理种蛋110枚，封口后孵化。出壳9只G0代，出壳率为8．18％。经检验6只鹌鹑中有4只

期刊

脂质体转染成年转基因鹌鹑荧光检测阳性率liposome transfection mature transgenic quail fluoresce

胸膜肺炎放线杆菌三聚体自转运黏附素功能区的表达及黏附活性

试验对三聚体自转运黏附素（TAAs）的重要功能区第1 703～2 018氨基酸残基区域进行原核表达,并利用激光共聚焦显微镜观察重组蛋白在猪肺上皮细胞的结合部位,通过黏附抑制试验研究该

期刊

胸膜肺炎放线杆菌三聚体自转运黏附素重组蛋白Adh4黏附Actinobacillus pleuro pneumoniae trimeric atuotr

小鼠Dazl基因融合蛋白表达载体的构建及转染

根据NCBI数据库上公布的小鼠Dazl基因的mRNA序列设计引物，以小鼠睾丸组织RNA为模板，RT—PCR扩增小鼠Dazl基因编码区片段，并将其克隆到增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP—C1中，构

期刊

小鼠生殖细胞Dazl基因绿色荧光蛋白mouse germ cell Dazl gene GFP

柔嫩艾美耳球虫石家庄株的生物学特性与抗药性研究

用5×104个柔嫩艾美耳球虫石家庄株孢子化卵囊感染14日龄雏鸡,对卵囊潜隐期、最早孢子化时间、形态及大小等生物学特性进行了测定。并以最适抗球虫活性百分率（POAA）、病变

期刊

柔嫩艾美耳球虫石家庄株生物学特性抗药性Eimeria tenella Shijiazhuang strain biological characte

过氧化氢诱导BRL细胞凋亡损伤模型的建立

动物冷应激过程中肝脏因发生氧化应激而受损。本试验采用过氧化氢(H2O2)诱导buffalo大鼠肝细胞(BRL)凋亡,建立体外氧化应激的凋亡损伤模型,为深入研究冷应激对肝脏损伤的机理

期刊

过氧化氢氧化应激凋亡BRL细胞hydrogen peroxideoxidative stressapoptosisBRL cell

鹿布鲁菌分型实时荧光定量PCR检测方法的建立

鹿布鲁菌病主要是由牛型、羊型和猪型布鲁菌引起的,其他感染型少见,本研究依据布鲁菌的特异性基因BruAB20168、BMEII0466、BR0952上的部分高度保守片段设计猪型、牛型、羊型

期刊

鹿布鲁菌分型实时荧光定量PCRdeer brucellosis types realtime PCR

胰岛素、胰高血糖素和神经肽Y对体外培养犊牛肝细胞硬脂酰CoA去饱和酶mRNA表达的影响

在应用实时荧光定量PCR法观察胰岛素（In）、胰高血糖素（GLN）、神经肽（NPY）对体外培养新生犊牛肝细胞硬脂酰CoA去饱和酶（Stearoyl CoA desaturase,SCD）mRNA丰度的影响。结果显示,随着培

期刊

硬脂酰辅酶A去饱和酶胰岛素胰高血糖素神经肽Ystearoyl-CoA desaturase insulin glucagon neuropepti

环丙沙星和磺胺间甲氧嘧啶联合用药在猪体内的血浆药动学

采用高剂量CIP（20mg/kg体质量）和SMM（100mg/kg体质量）联合肌注给药,同步检测试验猪各采血点的血药浓度,通过DAS药物动力学程序软件分析血药浓度—时间数据。结果显示：CIP和SMM在联

期刊

联合给药环丙沙星磺胺间甲氧嘧啶猪药代动力学同步检测combinational administration ciprofloxacin su